本文標(biāo)題："血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)步驟簡(jiǎn)介-實(shí)驗(yàn)教學(xué)顯微鏡"

血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)步驟簡(jiǎn)介-實(shí)驗(yàn)顯微鏡

   (1)顯微鏡下無(wú)菌條件，剪取一段長(zhǎng)為10---15cm動(dòng)物大血管(頸總動(dòng)脈、股動(dòng)脈等)
       或人的臍靜脈，將其放人盛有PBS液的培養(yǎng)皿中。
    (2)用眼科剪及眼科攝剔除附著在血管外壁上的結(jié)締組織.
    (3)將PBS液注人血管中，沖洗管腔中的殘血.
    (4)用PBS液洗滌血管3-4次。
    (5)血管的一端用止血鉗夾緊或用細(xì)線結(jié)扎，另一端插人靜脈留置針.
       用細(xì)線將其結(jié)扎、固定。
    (6)利用靜脈留工針將0.1%的膠原酶注人血管中，使之充盈，于37't消化3^-15min,
    (7)在血管的游離端剪開(kāi)一小切口，將消化液收集于離心管，用溫?zé)岬呐囵B(yǎng)液沖洗
       血管腔3次.也收集于離心管中。
    (8) 1000r/min離心10min，棄上清。
    (9)向離心管中加人培養(yǎng)液，吹打制懸.
    (10)將細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶中，于37℃培養(yǎng)，每隔2-3d換液1次。
 

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