本文標(biāo)題："標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)微生物是最廣泛應(yīng)用的一種方法"
發(fā)布者：yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)微生物是最廣泛應(yīng)用的一種方法
從環(huán)境試樣中分離微生物的過程常常需要進(jìn)一步分離從涂布或傾注平板法中
發(fā)現(xiàn)的單個(gè)菌落，對(duì)其鑒定或確認(rèn)。在這個(gè)方法中，常用無菌接種環(huán)把菌落從原
始培養(yǎng)平板中挑取并劃線稀釋到新的瓊脂培養(yǎng)皿中
標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)微生物是微生物學(xué)中最古老、最廣泛應(yīng)用的一種方法。
盡管廣泛應(yīng)用，這種稀釋平板技術(shù)自從它的使用之初就受到懷疑和批評(píng)。主要批
評(píng)的一點(diǎn)是:像顯微觀察那祥，整個(gè)群體中僅有很少部分能在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基中培
養(yǎng)。大量文獻(xiàn)說明，直接顯微計(jì)數(shù)的細(xì)胞數(shù)中只有1%一10%的細(xì)胞能用平板計(jì)
數(shù)技術(shù)復(fù)活成可活的細(xì)菌。各種方法之間存在的巨大差異可能是多
方面的因素產(chǎn)生的。首先，低底物水平的環(huán)境試樣中含有一些營養(yǎng)饑餓或寡營養(yǎng)
生物，它們生長得很慢或根本就不可培養(yǎng)，所以不能在規(guī)定時(shí)間內(nèi)形成菌落;其
次，由于提取和稀釋過程中施加的壓迫導(dǎo)致活的微生物變得不可培養(yǎng);再一個(gè)原
因就是菌落形成過程中細(xì)菌間的競(jìng)爭(zhēng)抑制了某些微生物的生長;另外，所有微生
物都在營養(yǎng)物和電子受體需求方面有不同的最適宜及最低的生長條件。因此，某
些微生物在培養(yǎng)基中長得很慢或根本不生長。因?yàn)榇蠖鄶?shù)自然環(huán)境都是寡營養(yǎng)
的，因而平板培養(yǎng)基的營養(yǎng)狀況是進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)所考慮的重點(diǎn)。許多土壤分離
菌在貧營養(yǎng)培養(yǎng)基中比富營養(yǎng)培養(yǎng)基中生長、繁殖得更好。最后，活細(xì)菌的回收
(指使一個(gè)細(xì)胞形成一個(gè)菌落)所產(chǎn)生的偏差是由于提取步驟中細(xì)菌從土壤顆粒
中的不完全釋放或稀釋過程中細(xì)菌的不完全分離。這使得菌團(tuán)長成了單個(gè)菌落，
從而導(dǎo)致出現(xiàn)的菌落數(shù)偏低。很難確定這些因素中是哪一種導(dǎo)致直接計(jì)數(shù)與活細(xì)
胞計(jì)數(shù)間存在的1-2個(gè)數(shù)量級(jí)的差異。
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