本文標題："測量酶活性可用中止反應(yīng)試驗-生物實驗"
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測量酶活性可用中止反應(yīng)試驗-生物實驗
中止反應(yīng)法測定酶活性
測量酶活性可用中止反應(yīng)法(Stoppedmethod)或連續(xù)反應(yīng)法中
止反應(yīng)法是將酶反應(yīng)按時即刻完全停止，取出反應(yīng)物或產(chǎn)物，于以
分離，再確定產(chǎn)物的生成量或反應(yīng)物的消耗量，算出酶活性。連續(xù)
反應(yīng)法無需取樣中止反應(yīng)，而是在酶反應(yīng)過程中，用儀器來監(jiān)測反
應(yīng)進行的情形，記錄結(jié)果，算出酶活性。連續(xù)法用一個樣品可以作
多次測定，使用方便，又極易查出動力學(xué)的反應(yīng)級數(shù)。若是零級反
應(yīng)，產(chǎn)物的量當(dāng)與酶活性成正比，可以立刻算出結(jié)果，但是很多酶
反應(yīng)卻無法使用連續(xù)法，而中止反應(yīng)法雖略感不便，幾乎任何酶都
可以用這種方法測量酶活性。
中止反應(yīng)法 中止反應(yīng)法是在酶和底物的恒溫反應(yīng)過程中，在
到達各個予定的時間時，取出定量的樣品，使酶立刻變性，不再反
應(yīng)，然后測量反應(yīng)產(chǎn)物的生成量。由零時開始，產(chǎn)物的生成量至少
在開始階段的一兩分鐘內(nèi)應(yīng)形成直線形的增加，否則一定是測量錯
誤，或反應(yīng)條件不對，才會發(fā)生偏差。欲使酶變性，最常用的方法
是加入三氯乙酸或過氯酸使酶蛋白沉淀。
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