本文標(biāo)題:"生物細(xì)胞膜的微生物分析圖像顯微鏡"
發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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生物細(xì)胞膜的微生物分析圖像顯微鏡
迄今為止,在自然界中存在的微生物,被人們分離研究的僅占很小一
部分,得到定種的原核生物僅有5 000多種,其中主要原因就在于自然界存
在的大多數(shù)(甚至超過(guò)99 o/6)微生物在目前條件下不能或很難在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)
行人工培養(yǎng),不可能得到其純培養(yǎng)物,所以很難對(duì)其進(jìn)行形態(tài)、生理和遺
傳等特性的研究。也就是說(shuō),傳統(tǒng)的基于培養(yǎng)的微生物技術(shù)在微生物生態(tài)
學(xué)研究中有很大的局限性,培養(yǎng)基本身實(shí)際上具有一定的選擇性,且無(wú)法
還原微生物的真實(shí)生境;培養(yǎng)過(guò)程是一個(gè)重新選擇的過(guò)程,存在著很多不
確定性,其結(jié)果不能反映原始的群落結(jié)構(gòu)。因此,傳統(tǒng)方法只能提供微生
物群落的一小部分信息,不能滿足對(duì)微生物整個(gè)生態(tài)系統(tǒng)的總體認(rèn)識(shí)研究
的需要
現(xiàn)代方法主要是采用分子生物學(xué)手段和現(xiàn)代生化分析技術(shù),對(duì)自然界
芽孢桿菌的核酸多樣性及細(xì)胞組成成分的多樣性進(jìn)行研究,了解芽孢桿菌
種類的多樣性和在不同環(huán)境中的分布規(guī)律,常用方法有16S rRNA分析、核
酸探針雜交法、變性劑梯度膠電泳、溫度梯度膠電泳、磷脂脂肪酸分析、
脂肪酸(FA)譜圖以及脂肪酸甲酯(FAME)譜圖分析等。下面介紹兩種比較流
行的方法。
近年來(lái),基于現(xiàn)代生物化學(xué)技術(shù)發(fā)展起來(lái)的磷脂脂肪酸分析方法得到
迅速應(yīng)用。磷脂是幾乎所有生物細(xì)胞膜的重要組成部分,細(xì)胞中磷脂的含
量在正常的生理?xiàng)l件下是恒定的,約占細(xì)胞干重的5%。不同的微生物,PL
FA的種類和數(shù)量不同,一些脂肪酸還可能特異性地存在于某些種類微生物
的細(xì)胞膜中,因此磷脂脂肪酸可作為微生物群落的標(biāo)記物。由于磷脂只能
作為活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組成,不能作為細(xì)胞的貯存物質(zhì),在細(xì)胞死亡后會(huì)很快
降解,因此磷脂只能代表微生物群落中有生命活力的那部分群體,適合于
微生物群落的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。
由于生物體內(nèi)細(xì)胞中磷脂的含量是相對(duì)顯著恒定的,因此,PLFA譜圖
的變化是源于樣品中微生物的組成和生物量發(fā)生變化。不同菌群的PLFA特
征譜圖不同,在高度專一性基礎(chǔ)上具有多樣性,可以作為微生物群落中不
同群體的標(biāo)記物。因?yàn)楦鞣N菌群的微生物生物量和群落組成很難與其他樣
品相同,所以每種樣品具有獨(dú)特的PLFA譜圖
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